Kari B. Green-Church, 1 Igor Butovich, 2 Mark Willcox, 3 Douglas Borchman, 4 , Friedrich Paulsen, 5 Stefano Barabino, 6 and Ben J. Glasgow 7,8

涙液層（ TF: tear film ）の分子構成（タンパク質と脂質など）と涙液層へのマイボーム腺の関与について解明することは、涙液層の不安定 化 、ドライアイ症候群、コンタクトレンズ（ CL ）不耐症および眼疾患の理解を深める上できわめて重要である。涙液層の脂質層は、水分の蒸発の抑制、 眼 表面の透明性の維持、細菌や塵埃・花粉など有機物から の眼の 保護といったさまざまな機能を持つ 1 。涙液層にはタンパク質、酵素、脂質、ムチン、塩類などの複雑な混合物が含まれており、それらによって涙液層の機能が発揮されている（ Fig.1 ）。研究者たちは、外層の脂質層は、 5 ～ 10 分子の厚みで、主としてワックスエステルとステロールエステルで構成されており、明確な連続する分子層形成するのではなく、互いに、そしてタンパク質とも 相互作用していると考えている 2,3 。干渉計を用いた研究によると、涙液層の油層の厚さは 20 から 160 nm である 4 。ここで脂質分子の大きさをおよそ 2.2 nm （ 22 Å ）とすると、層ひとつの厚みは 11 から 44 nm という計算になる。極性および非極性の脂質が加わると脂質の厚みが増すことから、厚み の実測値と一致するためには、涙液層の脂質成分が多層の厚みを持っている、または別の寄与因子があることが考えられる 5 。

ける涙液層の脂質および脂質 - タンパク質の相互関係に対するマイボーム腺の関与について検討することを目的にしている。

涙液油層の総説

ヒトの涙液層の主な 脂質 源はマイボーム腺である。マイボーム腺分泌物は、いろいろな種類の極性・非極性脂質のきわめて複雑な混合物であり、コレステリルエステル（ CE: cholesteryl ester ）、トリアシルグリセロール、遊離コレステロール、遊離脂肪酸（ FFA: free fatty acid ）、リン脂質、ワックスエステル（ WE: wax ester ）、ジエステルを含んでいる 6-9 。こうした分泌物を指す用語であるマイバム（ meibum ） が用語集に記載されたのは、 1981 年以降のことである 10 。

明確に区分できる 3 つの層、すなわち糖衣（グリコカリックス）層、中間の水層、外表面の涙液油層（ TFLL:tear film lipid layer ）からなる現在の涙液層モデルが最初に提唱されたのは 1950 年代である 11 。糖衣層は角膜上皮を覆っており、膜結合型および分泌型ムチンを多量に含むので比較的粘性が高いと考えられている。水層は水溶性タンパク質、ムチン、塩類 に富むが、涙液油層は脂質とそれに結合もしくは挿入されるタンパク質だけでほぼ構成されている 2 。涙液油層は通常は 2 層構造を呈しており、極性脂質でできている下副層と、非極性脂質でできていて外気に触れている上層からなる 11 。この説は、 Holly 12 が最初に提唱し、後に Shine と McCulley 13 が洗練させていった。それぞれの副層には異なる役割がある。すなわち、上副層はその下に広がる涙液層の水層をすっぽり覆う厚い毛布のようなものであり、脂 質膜はその膜厚と成分に依存して水蒸気透過率が低いので、最表面の脂質成分が水分蒸発を遅らせていると考えられている 13 。非極性脂質は、水層の副相の上に広がっている時には熱力学的に不安定であり、容易に壊れて脂質小滴を形成する。そうなると涙液層の水層が剥き出しにな り、急速に蒸発することになる 13 。興味深いことに、下副層の脂質層が界面を作って、上層の安定に役立っていると考えられている。この界面において、極性脂質は疎水性の尾部を非極性脂質副 層に入れた状態で垂直方向を向いており、極性を持つ頭部を水層に触れさせていると考えられている。 Shine と McCulley 13 はこの極性脂質副層は分子 1 個から 3 個の厚みであると述べている。彼らはさらに、この極性脂質副層を構成するものはリン脂質を始めとする極性脂質であり、フォスファチジルコリン、フォスファ チジルエタノールアミン、スフィンゴミエリン（ SM: sphingomyelin ）、セラミド、セレブロシドなどが含まれるとしている 13 。最近になって、両親媒性脂質のもうひとつのグループすなわち超長鎖 (O- アシル )-ω- ヒドロキシ脂肪酸がマイバム成分として見つかり、これが極性脂質副層に寄与しているという説が出されている 14 。極性－非極性脂質層の厚みの実測はまだ行なわれていないが、極性脂質は全脂質分画の 5 ％から 15 ％ 2,6 になると言われている。したがって、この極性のある界面活性物質層は分子 7 個から 20 個の厚みで、極性脂質層の上により疎水性の高い脂質があるという構成になっていると想定されている 6,15 。この推測には、（十分に可能性はあるが）異なるクラスの脂質が副層間で再配分することは考慮に入れておらず、涙液油層の全脂質成分の構成はマイバムと同 一であるという仮定に基づいている 2 。

脂質は、涙液油層に会合するクラスの分子のみではないと思われる。例えば、現在では、タンパク質が涙液油層の不可欠な要素と考えられつつあ る 2 。多くのタンパク質は表面活性化合物である。このことは、多くのタンパク質が気相液相界面に自然に密集することを意味し、水の界面張力が低下し、界面タン パク質層が形成される。バルク水相から気相液相界面へのタンパク質の移動は、概してタンパク質変性（すなわち、不可逆的構造変化―一般的にはアンフォール ディング―最終的にタンパク質の水深層への浸水を防ぐ）を伴う。これにより、タンパク質層が形成される 2 。

マイボーム腺の脂質が存在すると、タンパク質は占有する表面積について競合せざるをえない。この競合の結果、脂質層へのタンパク質の侵入 （挿入）または脂質層へのタンパク質の付着（もしくは会合）が起こる。いずれの場合も涙液層および涙液油層の表面特性に変化を来す。実際、涙液リポカリン （ Tlc ）が全体の電荷や構成成分に関係なく様々な人工脂質膜と能動的に相互作用できることを Saaren-Seppaälä ら 16 が実証しており、別のグループはマイボーム腺脂質に結合したヒト Tlc が薄膜を形成することを示している。これより以前に行なわれた同様の実験でも、その他の涙液タンパク質（リゾチーム 17 やムチンなど 3 ）が脂質層に侵入する可能性があることが示されている。

以上のように、涙液層の従来の 3 層モデル（ Fig.1 ）と 涙液油層 の 2 つの副層からなる最新の説は十分に根拠を持つ。この新しいモデルには、 涙液油層 に挿入または吸着しているタンパク質（リポカリン、 リゾチーム 、ムチンなど）と、ヒトのマイバムで最近同定された新しいクラスの脂質であり、最表面の非極性脂質副層と涙液層の水層との中間層をなす界面活性脂質副層の 形成に働いていると考えられる 8,15,18 、超長鎖 (O- アシル )-ω- ヒドロキシ脂肪酸が組み込まれていなければならない。

FIGURE 1. A proposed model of the precorneal tear film showing the relationship and interaction of lipid- binding proteins and the outer lipid layer.

脂質評価のための分析手法

脂質の検出と同定の技術の進歩に伴い、サンプルの質がきわめて重要となる。現代の装置では、広範囲の種類の成分を検出可能であり、その構造 について正確な情報を得ることができる。マイボーム腺の脂質の中で過去には検出や同定ができなかった多くの分析物が、たとえ微量にしか存在しなくとも、今 では見つけ出して分類することが可能である。

マイバムおよび涙液層中の脂質のサンプル採取と保存の方法

脂質サンプルの扱いと 保存は概して、 脂質化学の教科書に記載されている推奨と脂質化学企業のウェブサイト（例： http://www.avantilipids.com 、 technical support, lipid storage, and handling ）で入手できるプロトコールに準じ ている 19 。サンプルがプラスチック製ないしはシリコーン製の製品に曝露または接触することを最小限にする（または防止する）ために注意を払わなければならない。ガ ラス、ステンレス鋼、貴金属類、テフロン（ E.I. du Pont de Nemours and Co. , デラウェア州ウィルミントン）が、採取および保存のための素材として推奨される。脂質サンプルを保存するのに適した条件は、そのサンプルの由来を問わず、 低温 （ -80°C ）、 ガス（アルゴンまたは窒素）置換、乾燥した暗所である。

マイバムと涙液層のサンプルは、次のような 3 種類の主な手技で採取可能である： ( 1 ) マイボーム腺開口部からのマイバムの弱圧・強圧による圧出 10,20-22 、 ( 2 ) 涙液水層サンプルおよびマイボーム腺開口部からのマイバムのマイクロキャピラリーによる直接採取 23 、 ( 3 ) シルマー試験紙または同様の用具による涙液水層サンプルの採取 2,24,25 。動物実験およびヒト剖検ではもうひとつの手法として、眼瞼やマイボーム腺の外科的切除も用いられるが 26-28 、 生存する ヒト有志者に対しては現実的でない。

大量のサンプル量を採取できるが、 被験者にとっては不快感が大きい。いずれの手法とも、採取されるサンプルは涙液や周囲の組織（細胞または 残屑 ）で汚染される可能性がある。汚染の程度は患者および検者で 異なる可能性がある 。

サンプルが検者の皮膚分泌物 によって 汚染されることを防ぐために、検者はパウダーフリーでラテックスフリーの手袋を装用することが強く奨められる。サンプル採取の時に細隙灯を用いると、マイ ボーム腺開口部の視認性が向上し、眼瞼縁の涙液や残屑による汚染の機会を減らすことができる。

マイクロキャピラリーによる涙液層採取の手法は事実上無痛であり、下眼瞼の涙液メニスカスから涙液水層を直接採取することが可能である。涙 液分泌を刺激せずにこの手法で採取したサンプルは、一般的に 2 から 5 μL の間、すなわち数 μg の湿潤サンプルとなる 18 。マイクロキャピラリーによる手法は個別のマイボーム腺開口部からマイバムを直接に採取する際にも用いられている 22 。この手法は強圧による圧出に比べて患者の忍容性に優れ、侵襲も少ないが、採取できるサンプル量が少ない。マイバムサンプルは室温で固化する 18,29 。固化したマイバム脂質をマイクロキャピラリーから取り出すには細い金属線で押し出すか、またはクロロホルム / メタノールに単に浸すだけでもいい。マイバム採取にスパーテルを用いた場合は、サンプルを直ちに溶媒の中に保存する。マイクロキャピラリーでは、平均して 一眼あたり 15 mg のマイバムが採取される。この量はダウンストリーム質量分析による解析的分析を行なうには一般的に十分だが、タンパク質の抽出やさらなる分析を行なうため には、プールする必要がある場合もある。

患者はシルマー試験紙法を眼表面検査の 一般的項目とし て受け容れている。シルマー試験はマイクロキャピラリーによる手法ほどには患者にとって快適ではないが、その点はこの試験が サンプル採取の際に 鋭利で硬い器物を使用しないという安全性の高さで十分に補える。ただし、シルマー試験では涙液水層で試験紙を濡らさずにサンプルを採取することは事実上不 可能なため、純粋なマイバムのサンプルの採取には使えない。したがって、純粋なマイバムのサンプルの採取には圧出とマイクロキャピラリー採取またはスパー テル採取の組み合わせが適しており、マイクロキャピラリーとシルマー試験紙は涙液水層の採取に適していると思われる。脂質サンプルの採取と保存の別法と最 適法について、さらに評価を行なっていく価値がある。

薄層クロマトグラフィー

エレクトロスプレー法といったより新しい手法が急速に受け容れられてきており、それら単独で、もしくは TLC との組み合わせで利用されている。脂質サンプルは、誘導体化または標識を行なわなくても、 MALDI とエレクトロスプレー法で分析可能である。

質量分析

質量分析は非常に感度の高い分析法であり、極微量のサンプルから検出と構造決定が可能である。数多く発表されている質量分析を用いたマイバ ム研究では、分析法として GC-MS 10,33 、液体クロマトグラフ質量分析 7,9,18,20,34 、エレクトロスプレー法 8,9,23,35,36 、大気圧化学イオン化法 7,18,20 、 MALDI 37,38 が用いられている。ウサギとヒトの涙液からはリン酸化脂質が検出されており、独特な抽出法とサンプル調整を用いた MALDI-TOF （飛行時間型）法で分析されている 38 。ヒトのマイバム脂質を MALDI-TOF を用いて検出した論文はまだない

核磁気共鳴分光法

核磁気共鳴（ NMR: nuclear magnetic resonance ）は、 1 H 、 13 C 、 31 P 、 17 O 、 15 N などのスピンの性質を有する原子核の量子力学的な磁気特性を測定するものである 39,40 。 NMR 分光法はサンプルを破壊しないので、より複雑な HPLC や質量分析の測定にかける前に主要な脂質クラスを定量する手法として有望である。 NMR 手法は妥当性の検証が欠かせず、バンドの割り付けは注意深く確認しなければならない。 NMR の欠点は、ミリグラムの量のサンプル が必要であることと、ワックス類の NMR 分析で選択される溶剤である重水素化シクロヘキサンにはリン脂質が溶解しないことである。したがって、 NMR 分析にはプールしたマイバムサンプルが必要となる。

赤外分光法とラマン分光法

赤外分光法の基本原理は、入射電磁波（赤外線）と同じ周波数で電子双極子の結合状態が変化すると、光が吸収されることである。吸収された電 磁波の強度と周波数から分子の振動状態の遷移が測定でき、そこから、分子レベルでの成分、環境、立体配座に関する情報が得られる。赤外分光法とラマン分光 法は補完的な手法であり、いずれも振動モードを測定するが、対称的なバンドならば一般的にラマン分光法のほうが強度 は 大きく、非対称的なバンドならば赤外線吸収スペクトルのほうが強度 は 大きい。蛍光は、ラマンスペクトルほどには赤外スペクトルに干渉しないが、ほとんどの生物組織で見られる水バンドが赤外線スペクトルの特徴を圧倒して干渉 することがある。赤外線バンドはもともとラマンバンドよりも幅が広く、解像度が低い 39,40 。

ラマン分光法と赤外分光法は、ヒトのマイバムとヒトの涙液脂質の立体配座の解明に利用されている 24,41-44 。マイバムの成分構成は涙液脂質とは異なっており、 C=C と CH 3 成分が涙液脂質より多く含まれる。マイバムと涙液脂質では立体配座も異なっている 24 。

脂質の化学特性

45 。これらの脂質は親水親油バランス（ HLB: hydrophilic-to-
lipophilic balance ）が比較的高い。 HLB は、極性（水性）と非極性（油性）の副相間で溶解している分子の分配率を表わす客観的な物理化学パラメータである。したがって、油中水型エマルジョンにお いては、極性脂質は水層の副相内で凝集する。それに対して非極性脂質は水に溶解しない。このグループの典型的なメンバーとしては、炭化水素、超長鎖アシル セラミド、 WE 、 CE 、トリアシルグリセロールがある 45 。これらの脂質の親水親油バランスはきわめて低く、油中水型エマルジョンの油相のほうに容易に分配する。炭素鎖の長さ、構造における親水基の数と種類（水 酸基、アミノ基、カルボキシ基）、不飽和の程度、シス・トランス・イソ型異性体など、脂質の溶解度に影響する要因が多数存在することから、これら 3 つのグループの境界線は曖昧である 45 。

複合脂質の形成は、主としてエステル化とアミド化といった縮合反応を通じて生じる。エステル化反応は主要な複合脂質のほぼすべて（ WE 、 CE 、アシルグリセロール、リポ多糖）の生合成に関わっており、アミド化が形成に関与する脂質は脂肪酸アミド（ FA: fatty acid amide ）、 Cer 、 SM 、セレブロシドなどそれより少ない 45 。これらの反応は可逆的である。すなわち複合脂質は in situ で酵素的または非酵素的に加水分解され、その過程で、複合脂質はより単純な脂質と、グリセロール（アシルグリセロールの場合）や炭化水素（リポ多糖の場 合）といった脂質以外の物質の混合物に戻る 45 。

涙液層と 涙液油層 に関係する脂質の変質の種類として 2 番目に重要なものが、脂質の酸化である。脂質酸化の必須条件のひとつが脂質構造に二重結合が 1 つ以上存在することである。二重結合は酵素的または非酵素的に酸化することができる。多くの脂質には酵素的または自然発生的な変化で誘導される異性体があ る。高温、紫外線、酸化が異性体形成の一般的な原因である。これらの反応は、脂質とその混合物の物理化学性状を必然的に変化させる。というのも、 ( 1 ) 加水分解産物が一般的に元の複合脂質よりも水溶性が高く、 ( 2 ) 脂質の（過）酸化産物も酸素付加や短くて親水性の高い切断産物の形成により親水性が高くなり、 ( 3 ) 異性体形成によって脂質パッキングと脂質の物理性状（融点、沸点、密度など）が影響を受けるためである 45 。

現在では、ウェブサイトで脂質の情報を容易に入手することができる。 lipidmaps.org 、 lipidli-brary.co.uk 、 cyberlipid.com 、 hplc-ms.byrdwell.com 、 lipid- banks.jp などのサイトが推奨される。最近ではリピドミクスの概要も 発表 されており、これら生体分子の分子的構成が明確に説明されるようになっている 46 。

涙液層の脂質

正常のマイバム

を出している 57 。今日までにさまざまな手法で明らかにされた脂質のすべてを Table.1 にまとめた 7-10,13-15,20,23,29,32-34,36,47-50,52,56,58-74 。

マイバム脂質の中でもっとも頻繁に検出されるクラスはおそらく遍在する WE と CE である。この 2 種類を合わせて、マイバム脂質の 60 ％程度を占めると考えられている。 WE と CE はマイバムの中でもっとも疎水性の高い成分であり、その親油性に匹敵するのは炭化水素のみである。

近年、ヒトの正常マイバムの WE の特性が HPLC-MS n で明らかにされている 7,14,18,20 。多数の WE の 種類が検出されており、もっとも多く存在するものは 18 から 30 個 の炭素を持つ超長鎖飽和脂肪アルコールの C18:1- 脂肪酸由来のエステル体であった 7,18,20 。その後の研究により、記載される WE の種類がさらに増え、 C18:2 、 C18:3 、 C18:4 脂肪酸ファミリーなどが含まれるようになった。これらの脂肪酸はエステル化して、 C18:1 脂肪酸同様に、同じ長さの超長鎖脂肪アルコールになる。多価不飽和 WE は一価不飽和 WE に比べて少ないが、それでもマイバム成分として顕著に存在している。これらの多価不飽和 WE を詳しく分析すると、これらのファミリーの各メンバーの多くが、複数の異性体の形で存在していることが明らかになった。異性体は二重結合部位のシス・トラ ンス幾何学異性体である 可能性が高い 17 。例えば、 m/z 641 のある物質（ C26:0 アルコールと C18:4 ステアリドン酸のエステル、 FAl:FA 、 C26:0 ： C18:4 ）は 4 種類の異性体の形で存在しており、 C26:0 ： C18:3 は 3 種類、 C26:0 ： C18:2 は 2 種類の異性体で存在しているが、 C26:0 ： C18:1 は 1 種類の異性体のみで存在している。こうした観察データから、ヒトのマイバムに含まれる個々の WE 種の数は全部で 100 を超えることが想定される。直接注入型 ESI による WE の分析では、主に C18:1 が見つかるが、 C16:1 もかなりの量が存在する 8 。もうひとつのグループ（ CE ）に属するマイボーム腺脂質も同様に複雑である 8,15 。大部分の脂肪酸が中間的な長さの C18:1 から C18:4 に属する WE とは異なり、マイバムで検出される CE には超長鎖の飽和または不飽和脂肪酸もあり、その長さは炭素 18 から 34 個までの幅がある。ヒトのマイバムでは CE が 20 種類以上見つかっている。主体をなす種類は炭素 22 から 30 個 の脂肪酸による CE である。マイボーム腺の全 CE の中でのオレイン酸由来の C18:1CE （その他の組織や生物で一般的な CE のひとつ）のモル比は 5 ％に満たない。遊離コレステロールもマイボーム腺のステロールとステリルエステルにおいて 0.5 ％未満しかないようである 15 。

TABLE 1. Lipid Composition of Human Meibum*

できるものもあれば、反対に陽イオンの状態出のほうが容易に検出できるものもある。こうした制限が質量分析でリン脂質を直接的に正確に定量する道を難しくしている 77 。

ヒトのマイバムサンプルの脂質パターンには、多くの個人間相同性が見られる 9,36,79 。例えば、 Joffre ら 73 と Souchier ら 80 は、健常ドナーおよび、マイボーム腺機能不全（ MGD: meibomian gland dysfunction ）または涙液減少型ドライアイの患者のミノサイクリン治療の前後での FA 成分構成の変化を評価した。 FA 成分構成は、健常者では一定に保たれていて、涙液減少型ドライアイの患者もそれほど違いがなかった。しかし MGD 患者は異なる、しかも再現性のあるパターンを示し、飽和対不飽和脂肪酸比が低く、分枝型対直鎖型脂肪酸比が高かった。 Butovich ら 20,22 は、健常ドナーから採取したマイボーム腺脂質のサンプルを視覚的に比較したところ、成分構成が被験者間で再現性があることを報告している。

正常の涙液

質量分析において、フォスファチジルコリンと SM で見られるのと同じ有機リン酸エステルの信号が見られる 24,42,81 。

動物のマイバムと涙液層の脂質

マイバム脂質の動物研究は主にウシ（去勢雄ウシ）とウサギを対象にしたものだが、マウス、ハムスター、ラット、スナネズミといった他の種で も研究が行なわれている。動物マイバムの主な構成成分はステロールと WE であることが明らかにされているが 10,28,31,82,83 、マウスは CE が主体のようである 84 。調べられたすべての動物では、ウサギを除き、コレステロールが主なステロールのようだが 28,31,59,61,82,85,86 、ウサギでは 24,25- ジヒドロ Δ8- ラノステロールが主なステロールである 83 。その他にマイバムで同定されたステロールとしては、ウシで 5-α- コレスト -7- エン -3/β- オール 28 、ウサギでコレスタノール 82 、ハムスターで 3β- ヒドロキシ -5α- コレスタンと 3β- ヒドロキシ -A7- コレステン 85 、ラットでラトステロールとおそらくメチルステロール 58 、スナネズミで 3β- ヒドロキシ -5α- コレスタン 86 が見つかっている。ワックスエステルとステロールエステルをあわせると、重量比としてウシのマイバム脂質の 63 ％から 70 ％を占め 30 、ウサギのマイバム脂質では 78.5 ％ 82 を示す。 CE はウシのマイバムでは 32 ％から 41 ％を占める 10,31 。遊離コレステロールなどのその他のステロールは、ウシおよびウサギのマイバムではおよそ 3 ％程度を占めるに過ぎない 10,82 。

分枝鎖を高い割合で生合成することを明らかにしている。 C36 という長い超長鎖炭素鎖を有する同様の脂肪酸も、 ω- ヒドロキシ分画で見つかっている。アンテイソ型の C25 、 C27 、 C23 がもっとも強く標識されるアルコールであり、これにより、分離 した マイボーム腺の WE の脂肪アルコール 部分 が C23:0 から C27:0 の分枝鎖であるという Baron と Blough 31 の観察データが確認された。 Nicolaides ら 10 は、去勢仔ウシの脂質と WE 全体での脂肪アルコールが C18 から C31 の範囲であることを報告している。 WE で合成される主な脂肪鎖は、アンテイソ C15 、 n-C16 、アンテイソ - C17 、 n-C18:1 であるが、ステロールエステルで標識される主な脂肪酸はアンテイソ - C25 と - C27 である。去勢仔ウシの脂肪酸は、主にアンテイソ分枝型とアンテイソ飽和型で大部分が構成されている 10 。全脂質の 8 ％を占めるトリグリセリド分画は、ステロールエステルとワックスエステルの分画で見られるものと同じ標識脂肪酸で構成されている 28 。 ω- ヒドロキシ脂肪酸グループは、去勢仔ウシとヒトのマイボーム腺から同定されている。これらの酸は、去勢仔ウシの脂質中の全酸のうちおよそ 10 ％を占めており、主にモノエン脂肪酸であり、 C30 から C36 または C30 から C38 の範囲のメンバーによる 3 つの同族群を構成している 60,61 。

ウサギでは、脂肪酸と脂肪アルコールの鎖のすべてが飽和している。 C15 からＣ 29 の脂肪酸が圧倒的に多く、アンテイソ分枝型である。アンテイソ - C25 、 - C27 、 - C29 の 3 種類の脂肪アルコールが同定されている 82 。ジヒドロラノステロールのエステル体のみが、アンテイソ - Ｃ 15 から - C19 の脂肪酸を含む。主要な WE はアンテイソ分枝型 C25 から C31 の脂肪アルコールとアンテイソ分枝型 C15 から C19 の脂肪酸を含み、それらが組み合わさって C40 から C46 の範囲のエステルを形成する 83 。 FFA は全脂質の中で 4.4 ％ ± 0.2 ％を占めるに過ぎない 82 。

ウサギの涙液とマイバムのリン脂質を、 Greiner ら 27 が独自の NMR 研究で調べており、ウサギのマイバムのリン脂質はフォスファチジルコリンが 40 ％、フォスファチジルエタノールアミンが 18 ％、 SM が 9 ％、エタノールアミンプラスマローゲンが 9 ％、フォスファチジルセリンが 7 ％、ジヒドロスフィンゴミエリンが 6 ％で構成されていると報告した。 Ham ら 37 は、正常ウサギと外科的にドライアイにしたウサギの涙液に血小板活性化因子やリソフォスファチジルコリンに近縁の化合物種、フォスファチジルコリン、 SM が存在すると報告した。ドライアイウサギの涙液では、正常ウサギに比べて、 SM の種類が増え、濃度も 上昇 した 37 。さらに彼らは、正常ウサギの涙液ではフォスファチジルセリンは検出されないが、ドライアイウサギの涙液からは検出されることも報告している 37 。ウシ（去勢仔ウシ）のマイバムにおける極性脂質の量は、 総 脂質の 13.3 ％であると報告されている 10 。

疾病時のマイバム脂質の変化

McCulley ら 88 は、いろいろな形態の眼瞼炎にマイボーム腺分泌物の脂質構成の変化が見られることを示した。また、マイボーム腺角結膜炎（ MKC: meibomian keratoconjunctivitis ）の患者から得たマイボーム腺分泌物は、ワックスエステルとコレステロールの不飽和脂肪酸および不飽和アルコールの割合が小さく、場合によってはトリグリ セリドのプロファイルにも違いが出ることがある 33,68,69 。

ドライアイ症状も合わせ持つ眼瞼炎患者のマイバムでは、フォスファチジルエタノールアミン（ PE: phosphatidyl ethanolamine ）と SM の割合が一般的に小さい 89 。 In vitro において SM は、フォスファチジルコリン単分子層での不飽和脂肪酸の過酸化を阻害することができ 90 、重度から中等度のドライアイ患者または涙液層産生は良好だが症状が健常対照者よりも強い患者の涙液において、脂質過酸化種が有意（ P < 0.05 ）に増加していることが示されている 91 。あるいは、脂漏性 MGD の患者のマイバムでオレイン酸が増加していることが、このグループの患者で見られる臨床的に灼熱感の自覚症状が顕著であるという説明のひとつになる可能性 がある 92 。

眼瞼炎のそれぞれの 形態 で見られる脂質の種類の差の一部は、脂質を加水分解することができるある種の眼瞼常在細菌の存在が理由である可能性がある。ブドウ球菌感染の臨床所見が現 われている 脂漏性 MGD 患者には、コレステリルオレイン酸の加水分解能を持つコアグラーゼ陰性ブドウ球菌（ CNS: coagulase-negative Staphylococcus ）が健常者よりも多く棲息している 65 。

また、抗アンドロゲン療法を受けている男性、完全型アンドロゲン不応症の女性、シェーグレン症候群患者からなるアンドロゲンホルモン欠乏症 の患者群においても サブグループ に違いがあることが示されており、全員が極性および非極性脂質の成分構成に変化が見られた 34,38,64,79 。

閉塞性 MGD は腺構造の異常があることと圧出された脂質の粘性に変化があることが特徴である 64 。 MGD 患者の脂質成分構成の分析により、トリグリセリドとコレステロールが有意に減少しており 93 、一価不飽和脂肪酸、特にオレイン酸の量が 減少 していることが示された 92 。非極性脂肪酸の不飽和度が低下すると、融点が上昇する傾向があり、その結果、中央導管内でマイバムの粘度が上がることになる。マイボーム腺疾患患者のマ イバムは脂質の 配向 と相転移温度が高くなっていることが赤外線研究で示されている 44 。

近年、 Joffre ら 74 が、眼瞼炎患者のシルマー試験紙から集めた分泌物の脂肪酸プロファイルが、対照者とは有意に異なっていることを示した。全飽和脂肪酸は対照者では 24.6 ％を占めているのに対し、眼瞼炎患者では 9.3 ％であり、パルミチン酸（ C16:1 ）とステアリン酸（ C18:0 ）の量が少なかった。分枝型脂肪酸の割合は MGD 患者のほうが大きかった。興味深いことに、眼瞼炎患者とドライアイ患者との間では脂肪酸の成分構成に若干の違いが観察され、ドライアイ群ではリノレン酸の 割合が 50 ％を超えていた 74 。

MGD に続発する涙液油層の変化は、コントラスト感度で測定する視力 94 と、眼表面からの涙液の蒸発 95 に対して悪く影響する。 Gilbard ら 95 は、ウサギにおいてマイボーム腺閉塞で涙液の浸透圧が亢進することを示した。これは涙液層からの水分の蒸発率が上昇したためだと考えられる。 Goto ら 96 は、脂質層の変化が MGD 患者の涙液蒸発亢進の決定因子になっており、それが原因となって高張化が促進し、さらに眼表面上皮の炎症反応と損傷が引き起こされる可能性があるとしてい る。 FFA は尋常性痊瘡において皮膚を刺激することが判っているので、マイボーム腺脂質の生化学的変化が眼組織に対して直接的な毒性を持つ可能性もある 76 。

MGD の FFA レベルは正常の FFA レベルより一貫して高いという知見は、 MGD に伴う症状の理由になる可能性がある。しかし、ヒト結膜の培養細胞をイソ - C16 とイソ - C20 で処置して分枝型脂肪酸の影響を調べた研究では、細胞毒性のパラメータへの影響がまったく示されなかった。ミトコンドリアの脱水素酵素活性のみが、イソ - C20 濃度の 上昇 に関連して有意に低下した 74 。

酒さ性痊瘡が MGD に伴って見られる 97 。トリグリセリドと FFA の濃度 、特に一価および多価不飽和型のものが増加し、それが好中球と炎症メディエータの活性に関与している可能性がある 69 。さらに、酒さを有する患者の眼の微生物叢の分析ではすべての患者で細菌増殖が示されており 98 、このことから、酒さがリパーゼ産生を誘発し、さらに涙液層の脂質層とその防御的役割を乱していることが考えられる。

コンタクトレンズ上の脂質

CL の種類

polymethyl methacrylate ）で作られていた。新世代のハードレンズ（硬質ガス透過性（ RGP ）レンズ）は、材質にフッ素および / またはシリコーンを添加して、酸素輸送能を強化している。ハード CL は 4 つのグループに分類される。素材にシリコーンもフッ素も含まないグループ I 、素材にシリコーンは含むがフッ素は含まないグループ II 、シリコーンとフッ素を含むグループ III 、フッ素は含むがシリコーンは含まないグループ IV である 99-101 。

ソフト CL は従来からメタク リル酸 ヒドロキシエチル （ HEMA: hydroxyethyl methacrylate ）で作られており、ビニルピロリドンかメタクリル酸を加える場合もある。米国食品医薬品局（ FDA ）はソフト CL の水分含有量とレンズ材質の全体的なイオン性状に基づいて複数のグループ（ I から IV ）に分類している。 Table.2 にソフト CL の性状をまとめた。


1999 年以降、いわゆるシリコーンハイドロゲル CL が市販されている。この種のレンズはシリコーンとフッ素の添加により酸素透過性を高めるがソフトレンズの形状は維持する（ 10 ％を超える水分含有率の素材）ことを目的にデザインされた。このレンズは上に概要を示した FDA ソフトレンズ分類体系で分類されている。しかし、これらは古典的な HEMA 素材のソフトレンズとは化学性状が大きく異なっているので、これらのレンズを分けて分類し、ソフトレンズ分類体系の中で独自のグループ（グループ V ）とすることが提唱されている（ Table.3 ） 101 。

脂質の沈着

マイボーム腺に由来する脂質はレンズの装用を容易にするためには不可欠だと考えられるが 102 、 CL 表面への脂質沈着で臨床的に合併症が引き起こされる可能性があると分析している学者もいる。 In vitro 実験によれば、 RGP レンズの脂質沈着はレンズ基材の疎水性に依存することが示されている 103 。シロキサニルアルキルアクリル酸とフルオロシロキサニルアルキルアクリル酸のポリマー（それぞれシラホコン A とパフルホコン B ）では、シロキサニルアルキルアクリル酸製レンズにおいてのみ、人工涙液中の脂質でタンパク質沈着が増強されたが、人工涙液中のタンパク質で脂質沈着が抑 えられた 103 。

また、グループごとで脂質沈着に違いが見られる。グループ IV のハイドロゲルレンズはその他のグループのレンズよりもフォスファチジルコリンに結合しやすく（とは言ってもレンズあたり１ μg 未満）、これは正に荷電したコリン残基と負に荷電したレンズ表面との間の相互作用を反映したものと考えられる 104 。

TABLE 3. Proposed Classification of Silicone Hydrogel Lenses

From the 1 Department of Molecular and Cellular Biochemistry, Ohio State University, Columbus, Ohio; the 2 Department of Ophthalmology, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas Texas; the 3 Brien Holden Vision Institute, Sydney, New South Wales, Australia; the 4 Kentucky Lions Eye Center, Department of Ophthalmology and Visual Sciences, University of Louisville, Louisville, Kentucky; the 5 Department of Anatomy II, University of Erlangen-Nürnberg, Erlangen, Germany; the 6 Clinica Oculistica, Department of Neurosciences, Ophthalmology, and Genetics, University of Genoa, Genoa, Italy; the Departments of 7 Ophthalmology and 8 Pathology and Laboratory Science, Jules Stein Eye Institute, University of California Los Angeles, Los Angeles, California.

Supported by the Tear Film and Ocular Surface Society (TFOS; http://www.tearfilm.org); individual author support is listed in the Appendix of the Introduction.

Submitted for publication December 6, 2010; accepted March 23, 2011.

Disclosure: Each Workshop Participant's disclosure data can be found in the Appendix of the Introduction.

Corresponding author: Kelly K. Nichols, College of Optometry , 338 W. 10th Avenue , Ohio State University , Columbus , OH 43210-1280 ; knichols@optometry.osu.edu.